Actividad antifúngica de extractos de biomasa celular de Citrus x aurantium “naranja agria” sobre hongos fitopatógenos de Lactuca sativa “lechuga”

Abstract

Objetivo: evaluar la capacidad antifúngica de extractos alcohólicos obtenidos de la biomasa celular de naranja agria sobre el crecimiento de dichos hongos. Para ello, se emplearon plántulas de lechuga obtenidas in vitro, así como callos y yemas axilares derivadas de estas. Los explantes, de 1,5 cm de longitud, se cultivaron en medio MS al 100% suplementado con sacarosa y se incubaron a 26°C bajo un fotoperiodo de 16 horas de luz y 8 horas de oscuridad durante 30 días. Posteriormente, las hojas de las plántulas in vitro se diseccionaron y sembraron en placas con 2,4-D, manteniéndose durante 30 días en oscuridad a 26°C. Este procedimiento permitió obtener material vegetal adecuado para evaluar la actividad antifúngica de los extractos de naranja agria frente a los hongos patógenos de la lechuga. Los tratamientos fueron del T0 al T5, siendo este último el que nos dio mejor resultado con un 96% de formación de callos, de los cuáles el 52% fueron de grado 3. Posteriormente, se prepararon 2 matraces que contenían 1g de callos del T5 y 25mL del cultivo líquido suplementado con sacarosa para ser colocado e incubado en un shaker a 110 rpm con temperatura ambiente y ausencia de luz por 15 días, luego se renovó el medio de cultivo para ser incubado por 15 días nuevamente. Obteniéndose que al término de los 30 días se triplicó el peso inicial. Posteriormente, se purificó 3 veces con agua estéril, luego se deshumedeció a 55°C por 48h, se pulverizó y se disolvió 3g de biomasa obtenida en 20mL de etanol 96°, por último, se dejó a temperatura ambiente por 48h. Luego se empleó papel filtro N°4 y se secó a 40° por 18h. Para el antibiograma se utilizaron 1g y 2g del extracto concentrado en 1mL de etanol 70°. Posteriormente se inocularon los hongos a ser evaluados en agar Sabouroud (Botrytis sp. y Fusarium sp.). Luego se agregaron 5 discos de papel filtro de 6mm a los cuales se les agregó 25uL de cada tratamiento a evaluar y se realizaron 5 repeticiones por cada uno que se incubaron a 37° por 48h. Se evidenció que el T4 para el hongo Botrytis tuvo una inhibición del 52%, mientras que para Fusarium el T5 obtuvo una inhibición del 68%. Demostrando así la actividad antifúngica de los extractos alcohólicos de biomasa celular de naranja agria