Criopreservación de células mononucleares con leucemia linfoblástica aguda para maximizar la viabilidad celular

Abstract

La criopreservación de células mononucleares representa una estrategia fundamental en la investigación biomédica y en el ámbito clínico, al permitir la conservación de material celular viable para estudios posteriores y posibles aplicaciones terapéuticas. En el caso de la leucemia linfoblástica aguda (LLA), resulta prioritario establecer protocolos estandarizados que aseguren altos niveles de viabilidad celular tras el proceso de descongelación. El objetivo de la presente tesis fue evaluar distintos medios de criopreservación con el fin de identificar la formulación más adecuada para la criopreservar células mononucleares de pacientes con LLA. El estudio se llevó a cabo en la Unidad Funcional de Gestión del Banco Nacional de Tumores del INEN, utilizando un diseño experimental que incluyó tres medios de criopreservación: M1 (20% SBF + 10% DMSO + RPMI csp), M2 (40% SBF + 15% DMSO + RPMI csp) y M3 (80% SBF + 20% DMSO). Adicionalmente, se analizaron dos temperaturas de almacenamiento (-150 °C y -196 °C) y tres periodos de conservación (2 semanas, 1 mes y 3 meses). La evaluación de la viabilidad celular se realizó utilizando el método de exclusión con azul de tripán. Los resultados mostraron que el medio M2 alcanzó la mayor viabilidad (96.8%), seguido de M1, mientras que M3 obtuvo los porcentajes más bajos (90.0%). El tiempo de almacenamiento afectó significativamente la viabilidad, a diferencia de la temperatura, que no generó variaciones notables. En conclusión, el medio M2 se presenta como la opción más efectiva, aportando un protocolo confiable para optimizar la criopreservación en pacientes con LLA.